离.

二 分离方法：

1 蒽醌苷类和游离蒽醌衍生物的分离：用分步提取法（如前述） 2 游离蒽醌衍生物的分离：可选用分步结晶法、梯度pH萃取法或层析法进行.

梯度pH萃取法是分离游离蒽醌衍生物的经典方法：

1.局限性

2.原理 性质相似,酸性差别不大的混合物不适用

3 有些蒽酮虽然存在酚羟基,但在稀碱溶液中较相应的蒽醌难溶,

如大黄酚蒽酮-9,故蒽醌衍生物的苯提取液用极稀的NaOH液萃取,可除去蒽醌而使蒽酮留在苯液中. 示例

色谱法在蒽醌苷元分离中的应用：

一般先用经典方法（如梯度pH萃取）对其进行初步分离,再结合柱色谱法或制备性TLC法作进一步的分离,多用硅胶吸附色谱,而氧化铝一般不用,也常用聚酰胺作为柱色谱的填料.

•

三、 黄酮类化合物的提取与分离

（一）提取

黄酮甙类以及极性稍大的甙元（如羟基黄酮等）,一般可

用丙酮、醋酸乙酯、乙醇提取.一些多糖甙类可用沸水提取.在提取花青素类化合物时,可加入少量酸（0.1%盐酸,应当慎用,避免发生水解）.

剂进行提取.对得到的粗提物可进行下列精制处理,常用方法有：

（一）溶剂萃取法 利用黄酮类化合物与混入的杂质极性不同,选用不同溶剂进行地萃取可达到精制纯化目的.例如植物叶子的醇浸液,可用石油醚处理,以便除去叶绿素、胡萝卜素等脂溶性色素.而某些药料水溶液则可加入多倍量浓醇,以沉淀除去蛋白质、多糖类等水溶性杂质.

有时溶剂萃取过程也可以用逆流分配法连续进行.常用的溶剂系统有：水-醋酸乙酯,正丁醇-石油醚等.

溶剂萃取过程在除去杂质的同时,往往还可以收到分离甙和甙元或极性甙元与非极性甙元的效果.

（二）碱提取酸沉淀法 黄酮甙类虽有一定极性,可溶于水,但却难溶于酸性水,易溶于碱性水,故可用碱性水提取,再于碱水提取液中加入酸,黄酮甙类即可沉淀析出.此法简便易行,如芦丁、橙皮甙、黄芩甙的提取都应用了这个方法.

兹以从槐米中提取芦丁为例说明该法的操作过程. 槐米（槐树Sophora japonica L. 花蕾）加约6倍量水,煮沸,在搅拌

下缓缓加入石灰乳至pH8~9,在此pH条件下微沸20~30分钟,趁热油滤,残渣同上再加4倍水煎1次,乘热抽滤.合并滤液在60~70℃下,用浓盐酸调至pH为5,搅匀,静置24小时,抽滤.沉淀物水洗至中性,60℃干燥得芦丁粗品,于水中重结晶,70~80℃干燥得

芦丁纯品.

在用碱酸法进行提取纯化时,应当注意所用碱液浓度不宜过高,以免在强碱性下,尤其加热进破坏黄酮母核.在加酸酸化时,酸性也不宜过强,以免生成（金羊）盐,致使析出的黄酮类化合物又重新溶解,降低产品收率.

当药料中含有大量果胶、粘液等不溶性杂质时,如花、果类药

材,宜用石灰乳或石灰水代替其它碱性水溶液进行提取,以使上述含羟基的杂质生成钙盐沉淀,不致溶出.这也有利于黄酮类化合物的纯化处理.

（三）碳粉吸附法 主要适于甙类的精制工作.通常,在

植物的甲醇粗提取物中,分次加入活性炭,搅拌,静置,直至定性检查上清液无黄酮反应时为止.过滤,收集吸甙炭末,依次用沸甲醇、沸水、7%酚/水、15%酚/醇溶液进行洗脱,各部分洗脱液进行定性检查（或用PPC鉴定）.通过对Baptisia lecontei 中黄酮类化合物的研究证明,大部分黄酮甙类可用7%酚/水洗下.洗脱液经减压蒸发浓缩至小体积,再用乙醚振摇除去残留的酚,余下水层减压浓缩即得较纯的黄酮甙类成分.

怎样提取植物中的有效成分？这很难吗？

1. 选定植物/药材。无非是古方、验方、民间草药中找寻。目前常见不常见的药材都已经被研究过。 现在多是加大药材量提取分离含量低的组分，或者从苗医、藏医、蒙医、非洲、拉美等地方找没研究过药用植物。

2. 提取。溶剂石油醚、正己烷、环己烷、苯、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、丙酮、乙醇、甲醇、水（极性小→极性大)。 日常用药煎煮有效的，就用水和乙醇等极性大的溶剂提， 青蒿素之类水煮无效的就用石油醚等极性小的溶剂提取。 常见药材水/醇/醚 都来一遍，分离鉴定更多的化合物。

3. 分离。这是很主要的工作， 第2步提取出来的溶液中，有数十个化合物， 一般用柱层析的办法，也就是我们常说的冲柱子。 工作量大，枯燥，技术含量低。一个硕士可能做实验的2年每天干的都是这个。 如下图，分离化合物的柱子，大到高2米，小到10厘米。变换流动相溶剂条件、变换柱子的材料，不同条件不同分离原理柱子反复冲，才能分到单体化合物。

4. 结构鉴定。 第3步分离到单体化合物，利用红外、核磁、质谱等方法，鉴定化合物的结构，这个也不难，打了谱，不是特别复杂的结构对有经验的人都不是难事。硕士做完这个就能毕业，博士要发现新化合物，或者做5 才能毕业。

5. 活性研究。分离出的化合物经过体内和体外试验、细胞和动物实验， 大多数化合物活性就基本清楚，明白中草药起作用的物质基础，买本《中药药理学》教材看看，里面都是这方面的工作。

植物提取物顾名思义就是以植物为原料，经溶剂提取得到的物质成为植物提取物。

原料使用较多是药用的植物的根、茎、叶、花等部位，如银杏叶、甘草、山楂叶、人身等。目前也有从一些农作物中提取，如豆胚、玉米胚、豆粕、黑豆皮等。

溶剂通常用水或有机溶剂如乙醇、甲醇进行提取，用萃取法、层析法、超滤法、分子蒸馏法进行纯化。

干燥方式常常使用喷雾干燥、真空干燥、微波干燥、冷冻干燥等。

产品通常为粉末状态。

产品主要用于食品添加剂、功能食品原料、药品原料。产品多数出口到国外，如美国、欧洲、日本、韩国、印度等发达*。

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