植物病原真菌为什么采用组织分离法
一、实验原理
植物患病组织内的真菌菌丝体，如果给予适宜的环境条件，除个别种类外，一般都能
恢复生长和繁殖。植物病原菌的分离就是指通过人工培养，从染病植物组织中将病原真菌
与其它杂菌相分开，并从寄主植物中分离出来，再将分离到的病原菌于适宜环境内纯化，
这个过程总称植物病菌的分离培养。植物病原真菌的分离一般都是采用组织分离法，就是
切取小块病组织，经表面消毒和灭菌水洗过后，移到人工培养基上培养。
二、实验目的：
植物病原菌的分离培养是植物病理学实验很基本的操作技术之一，它对原害鉴定，病
原形态观察、植物病害接种体的培养等方面都是经常使用的研究手段。通过本实验，要求
植物病原菌分离培养的一般原则和方法。
分离植物内生菌，可以用什么表面消毒方法？
：１）在无菌工作台内，将欲分离内生菌的宿主样品用无菌水清洗；２）选用消毒后的密封容器，使上述清洗后的宿主样品完全浸没于所述密封容器内的无菌水中；３）然后将上述密封容器放入超声波消毒机的水槽内进行消毒，所述超声波消毒机的工作频率为１５～２５ＫＨｚ、功率为５０～２００Ｗ、时间为１０～３０分钟。采用本发明的消毒方法，既能充分消灭宿主表面的杂菌，又能很大限度减少宿主内生菌的损伤。
急急急~请问哪位高人知道植物内生真菌的分离方法？
从元江仙人掌的茎中分离到一株产广谱、高活性抑菌物质的内生真菌，经测定对细菌、植物病原真菌和皮肤致病真菌共21种病原微生物有较为明显的抑制作用。形态特征表明，该菌株与曲霉属（Aspergillus）中的土生曲霉（Aspergillus terreus）的特征基本一致，18SrDNA序列分析显示本菌株与土生曲霉的同源性高于99％，但该菌株的分生孢子梗上有明显的瘤状突起，不同于模式菌株。因此认为该菌株为土生曲霉的一个变种，命名为土生曲霉云南变种（Aspergillus terreus vat．yunnanensis）。并对其活性物质的生产条件进行了初步摸索，确定用查氏培养基为很佳种子培养基，PDA培养基为很佳发酵培养基，4d为很适发酵时间。
如何分离植物病原菌
取得该植物组织，试管内培养基上培养产生菌落，再转接种培养。
菌种是怎么分离的
从样品中分离菌种一般使用划线法和涂布平板法。划线法是利用平板划线的方法实现菌液的稀释，很终获得单菌落，该方法快速方便，容易操作；涂布平板的方法是先对样品做稀释梯度，然后选择3个连续梯度涂板，该方法的优点是可以对菌落计数，获得样品中不同菌种的数量信息（该方法是我的大爱，长出的菌落很漂亮）；对于特定类型的菌种还可以使用选择培养基进行分离（如培养基加氯霉素可以抑制细菌生长，用于分离酵母和霉菌；加山梨酸钾可以抑制真菌，用于分离生长较慢的细菌；加入氨苄的培养基只有含氨苄抗性的菌落能够生长）。
希望对你有帮助。
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